كيف يتم حساب تركيز الحمض النووي باستخدام مقياس الطيف الضوئي؟
كيف يتم حساب تركيز الحمض النووي باستخدام مقياس الطيف الضوئي؟

فيديو: كيف يتم حساب تركيز الحمض النووي باستخدام مقياس الطيف الضوئي؟

فيديو: كيف يتم حساب تركيز الحمض النووي باستخدام مقياس الطيف الضوئي؟
فيديو: قياس تركيز و نقاوة الدنا المستخلص 2024, شهر نوفمبر
Anonim

تركيز الحمض النووي يكون حسب تقدير قياس الامتصاصية عند 260 نانومتر ، وضبط A260 قياس التعكر ( يقاس ب الامتصاصية عند 320 نانومتر) ، تتضاعف بواسطة عامل التخفيف و استخدام العلاقة التي أ260 من 1.0 = 50 ميكروغرام / مل من الحمض النووي الريبي النقي.

يسأل الناس أيضًا ، كيف تجد تركيز ونقاء الحمض النووي؟

لتقييم نقاء الحمض النووي ، قم بقياس الامتصاصية من 230 نانومتر إلى 320 نانومتر لاكتشاف الملوثات المحتملة الأخرى. الأكثر شيوعا حساب النقاء هي نسبة الامتصاصية عند 260 نانومتر مقسومة على القراءة عند 280 نانومتر. جودة جيدة الحمض النووي سيحصل على A260280 نسبة 1.7 - 2.0.

وبالمثل ، ما هو تركيز الحمض النووي الجيد؟ أ حسن جودة الحمض النووي يجب أن تحتوي العينة على A260280 نسبة 1.7-2.0 و A260230 نسبة أكبر من 1.5 ، ولكن نظرًا لاختلاف حساسية التقنيات المختلفة لهذه الملوثات ، يجب أخذ هذه القيم فقط كدليل لنقاء عينتك.

فيما يتعلق بهذا ، كيف يقوم NanoDrop بحساب تركيز الحمض النووي؟

تقوم بضرب قيمة الامتصاصية عند 260 نانومتر في عامل ثابت (إنها 50 من أجل الحمض النووي ) وتحصل على تركيز الحمض النووي . هاهو. (حسنًا ، إنه من الناحية الفنية A260 لعينة بسمك 10 مم مضروبة في 50 ؛ نانو دروب تعبر عن A260 كما لو كانت العينة بسمك 10 مم ، كما هو الحال في الكوفيت القياسي).

لماذا كان علينا استخدام مقياس الطيف الضوئي لتحديد الحمض النووي لدينا؟

أ مقياس الطيف الضوئي هو قادر على تحديد متوسط تركيزات الأحماض النووية الحمض النووي أو RNA موجود في خليط ، وكذلك نقاوتهم. استخدام قانون بير لامبرت ذلك يكون من الممكن ربط كمية الضوء الممتصة بتركيز جزيء الامتصاص.

موصى به: