كم تكلفة تحويل الربط؟
كم تكلفة تحويل الربط؟

فيديو: كم تكلفة تحويل الربط؟

فيديو: كم تكلفة تحويل الربط؟
فيديو: طرق تحديد قيمة العملة 2024, شهر نوفمبر
Anonim

تحويل . أضف ما بين 1-5 ميكرولتر من ربط الخليط إلى الخلايا المختصة ل تحويل . وسعوا ربط مع PEG يؤدي إلى انخفاض في تحويل الكفاءة (سريع ربط عدة). يوصى باستخدام Electroporation للإنشاءات الكبيرة (> 10000 نقطة أساس).

من هنا ، ما مقدار منتج الربط الذي أحتاجه للتحويل؟

تحويل . أضف ما بين 1-5 ميكرولتر من ربط الخليط إلى الخلايا المختصة ل تحويل . وسعوا ربط مع PEG يؤدي إلى انخفاض في تحويل الكفاءة (سريع ربط عدة). يوصى باستخدام Electroporation للإنشاءات الكبيرة (> 10000 نقطة أساس).

بعد ذلك السؤال هو ما هو الربط والتحول؟ في تجربة استنساخ نموذجية ، أدخل الباحثون أولاً قطعة من الحمض النووي ، مثل الجين ، في قطعة دائرية من الحمض النووي تسمى البلازميد. تستخدم هذه الخطوة إنزيمات التقييد و DNA ligase وتسمى a ربط . بعد ربط ، فإن الخطوة التالية هي نقل الحمض النووي إلى بكتيريا في عملية تسمى تحويل.

بعد ذلك ، قد يتساءل المرء أيضًا ، ما مقدار الحمض النووي المطلوب للربط؟

يجب أن يكون التركيز الكلي للناقل + الإدخال بين 1-10 ميكروغرام / مل من أجل الكفاءة ربط . المتجه: يوصى بإدراج النسب المولية بين 1: 1 و 1:10 (1: 3 نموذجي). إذا كنت غير متأكد من الخاص بك الحمض النووي تركيزات ، إجراء عمليات ربط متعددة بنسب متفاوتة.

كم من الوقت يمكنك تخزين رد فعل الربط؟

يمكن الربط يتم إجراؤه في درجة حرارة الغرفة أو أكثر برودة (فكر في 12-16 درجة مئوية) بين عشية وضحاها أو حتى لبضعة أيام ، اذا أنت حقا مشغول. تستطيع أيضا تخزين ربط في الثلاجة وأخرجها لاحقًا لمواصلة الربط في درجة حرارة الغرفة لمدة طويل عند الضرورة.

موصى به: