جدول المحتويات:

كيف يتم تحميل هلام التفريد؟
كيف يتم تحميل هلام التفريد؟

فيديو: كيف يتم تحميل هلام التفريد؟

فيديو: كيف يتم تحميل هلام التفريد؟
فيديو: جهاز الهلام الكهربائي ( التشريد الكهربائي/ الترحيل الكهربائي)DIY Gel Electrophoresis 2024, ديسمبر
Anonim

تحميل العينات وتشغيل هلام الاغاروز:

  1. يضيف جار التحميل المخزن المؤقت لكل عينة من عينات الحمض النووي الخاصة بك.
  2. بمجرد ترسيخه ، ضع الاغاروز هلام داخل ال هلام علبة ( الكهربائي وحدة).
  3. يملأ هلام مربع مع 1xTAE (أو TBE) حتى هلام مغطى.
  4. بحرص حمل سلم الوزن الجزيئي في الممر الأول من هلام .

فيما يتعلق بهذا ، ما مقدار الحمض النووي الذي تحتاج إلى تحميله للهلام الكهربائي؟

كمية DNA للتحميل لكل بئر متغير. أقل كمية من الحمض النووي التي يمكن الكشف عنها ببروميد إيثيدوم هي 10 نانوغرام. الحمض النووي ستؤدي الكميات التي تصل إلى 100 نانوغرام لكل بئر إلى ظهور شريط حاد ونظيف على ملطخة ببروميد الإيثيديوم هلام.

بالإضافة إلى ذلك ، لماذا يتم استخدام العازلة في الرحلان الكهربائي للهلام بدلاً من الماء؟ ال متعادل ضروري للحفاظ على الرقم الهيدروجيني لمحلول الحمض النووي بالقرب من المستوى المحايد لأنه إذا كان يمكن أن يصبح حامضيًا من خلال التحليل الكهربائي. يمكن أن تسبب التيارات الكهربائية التي تسببها الأقطاب ماء تنفصل الجزيئات وتحرر أيونات H +.

يسأل الناس أيضًا ، لماذا تستخدم علامة في الرحلان الكهربائي للهلام؟

تتحرك الشظايا الأصغر بشكل أسرع ، وبالتالي أبعد ، من الشظايا الأكبر لأنها تتحرك من خلال ثعبان هلام . لماذا يتم استخدام علامة عند تشغيل الأجزاء من خلال هلام ؟ أ علامة يحتوي على أجزاء DNA ذات حجم معروف. علامات يتم تشغيلها في كل هلام للمقارنة مع شظايا مجهولة في أخرى هلام الممرات.

ما مقدار الحمض النووي الذي يمكن رؤيته على هلام الاغاروز؟

عظم الاغاروز الهلام بين 0.7٪ و 2٪. أ 0.7٪ سوف هلام إظهار فصل جيد (دقة) كبيرة الحمض النووي شظايا (5-10 كيلو بايت) و 2٪ سوف هلام عرض دقة جيدة للأجزاء الصغيرة (0.2-1 كيلو بايت).

موصى به: