ما هو الغرض من تنقية منتج PCR؟
ما هو الغرض من تنقية منتج PCR؟

فيديو: ما هو الغرض من تنقية منتج PCR؟

فيديو: ما هو الغرض من تنقية منتج PCR؟
فيديو: فارماستان - ثاليوم | واحد من أخـطر السموم على وجه الارض 2024, شهر نوفمبر
Anonim

طهارة من الحمض النووي من أ PCR عادة ما يكون التفاعل ضروريًا للاستخدام النهائي ، ويسهل إزالة الإنزيمات والنيوكليوتيدات والبادئات والمكونات العازلة. تم تحقيق ذلك تقليديًا باستخدام طرق الاستخراج العضوية ، مثل استخلاص الفينول كلوروفورم ، متبوعًا بترسيب الإيثانول.

السؤال أيضًا هو ، لماذا من الضروري تنقية منتجات PCR؟

أنت بحاجه إلى تنقية منتجات PCR للتخلص من البادئات والنيوكليوتيدات والإنزيمات غير المستخدمة من أجل تحسين نجاح الربط ، والتي ستحافظ وتسلسل المنتج من PCR . إلى تنقية ال منتجات PCR ، يتم استخدام كروماتوغرافيا استبعاد الحجم.

بالإضافة إلى ذلك ، ماذا أفعل بعد PCR؟ لتحقيق أقصى قدر من الانتعاش ، اشطف الكوب مرتين بنسبة 10 إلى 20 ميكرولتر أو الماء. الاخير PCR قد يحتوي التفاعل على ما يصل إلى ميكروغرام من الحمض النووي المضخم الذي يمكن استخدامه في مجموعة متنوعة من تطبيقات البيولوجيا الجزيئية. قد تكون هذه التطبيقات أكثر أو أقل حساسية للمكونات المتبقية من PCR مزيج التفاعل.

قد يتساءل المرء أيضًا ، كيف تنظف منتجات PCR؟

الأساليب الكلاسيكية المستخدمة ل ينظف فوق منتجات PCR قبل التسلسل تشمل الرحلان الكهربائي للهلام ، وترسيب الإيثانول ، وكروماتوجرافيا العمود. في حين أن هذه الطرق فعالة للغاية ، يمكن أن تصبح مرهقة بسرعة عند معالجة عينات متعددة على التوازي وتظهر درجات متفاوتة من فقدان العينة.

لماذا يجب تنظيف الحمض النووي؟

نحن ينظف فوق الحمض النووي من المحاليل المائية لإزالة الأملاح العازلة أو الإنزيمات أو المواد الأخرى التي يمكن أن تؤثر على التطبيقات النهائية. تشمل الأمثلة تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل ينظف فوق، ينظف حتى بعد هضم التقييد و ينظف حتى الجينوم أو البلازميد الحمض النووي ملوثة بالبروتينات الخلوية / الحطام.

موصى به: